一、細(xì)菌的傳播與致病
假單胞菌普遍存在,而在潮濕環(huán)境尤甚。銅綠假單胞菌是存在于人類中zui常見的一種假單胞菌，它偶爾可在腋下和肛門生殖道周圍的正常皮膚,但除非給服抗生素,在糞中甚為罕見。該菌通常伴隨毒力較強的細(xì)菌存在于病灶中,但偶爾也可單獨引起暴露于外部的組織感染.假單胞菌感染通常發(fā)生于醫(yī)院內(nèi)。洗滌槽,防腐溶液和貯尿容器中常可發(fā)現(xiàn)這種細(xì)菌。通過醫(yī)護人員可將病菌傳給病人,特別在灼傷和新生兒重癥監(jiān)護室.是重要的醫(yī)院內(nèi)病原菌。
銅綠假單胞菌引起的很多感染發(fā)生在衰弱或免疫受損的住院病人，它是重癥監(jiān)護室感染的第二位zui常見的病原菌,是換氣機相關(guān)性肺炎的常見原因。除醫(yī)院內(nèi)獲得感染外,HIV感染者很容易在社區(qū)獲得該菌的感染,而且一旦被銅綠假單胞菌感染,?？沙霈F(xiàn)晚期HIV感染的體征。
感染可發(fā)生于很多解剖部位,包括皮膚,皮下組織,骨,耳,眼,尿路和心臟瓣膜。感染部位與細(xì)菌的入口及病人的易感性有關(guān)。燒傷時,焦痂下區(qū)域可成為大量細(xì)菌侵犯的場所,進而成為引起菌血癥的病灶,而菌血癥常是燒傷的致死性并發(fā)癥。
本菌所致感染的臨床表現(xiàn)取決于受累部位。在住院病人中,若口咽部有綠膿桿菌和其他革蘭氏陰性桿菌共同繁殖,則氣管插管,氣管切開或間歇性正壓呼吸可引起肺部感染。囊性纖維病的后期性支氣管炎常見，分離得到的菌株有粘液狀菌落的形態(tài)學(xué)特征。燒傷伴有惡性腫瘤的病人常見在其血液中分離出該菌株,臨床表現(xiàn)為革蘭氏陰性敗血癥,有時出現(xiàn)壞疽性深部膿皰,其特征為直徑約1cm的紫黑色病變,中央?yún)^(qū)潰瘍,四周為紅斑。這種病變zui常見于腋下和肛門生殖器部位。該菌還是
尿路感染的常見病原菌,特別常見于有過泌尿科操作的病人,尿路梗阻的病人或接受廣譜抗生素的病人。
熱帶氣候條件下常見的外耳炎流膿是耳部感染zui常見的臨床類型。糖尿病患者可發(fā)生更為嚴(yán)重的惡性外耳炎,表現(xiàn)為嚴(yán)重耳痛常伴有單側(cè)顱神經(jīng)麻痹,需要腸外給藥治療。綠膿桿菌眼部感染一般表現(xiàn)為角膜潰瘍,zui多見于外傷之后,但有些病人也可因角膜接觸鏡片或鏡片液體污染而感染。引流的竇道,特別在足部外傷或深部穿刺傷后,可發(fā)現(xiàn)該菌菌。引流物常有汗味和果味.這種穿刺傷有很多可引起性蜂窩織炎和骨髓炎,為此除抗生素外,還要早期外科擴創(chuàng)。
罕見情況下該菌可引起心內(nèi)膜炎,通常發(fā)生于心臟直視手術(shù)所裝的人工瓣膜或靜脈吸毒者的自然瓣膜上。右側(cè)心內(nèi)膜炎用內(nèi)科治療,但為*累及二尖瓣,主動脈瓣或人工瓣膜的感染,通常必須將感染的瓣膜切除。
二、細(xì)菌的生物學(xué)特性
屬于假單胞菌屬，是一種非發(fā)酵革蘭陰性菌，菌體細(xì)長且長短不一，有時呈球桿狀或線狀，成對或短鏈狀排列。菌體的一端有一根鞭毛，在暗視野顯微鏡或相差顯微鏡下觀察可見細(xì)菌運動活潑。本菌生長溫度范圍25~42℃，zui適生長溫度為35℃，特別是該菌在4℃不生長而在42℃可以生長的特點可用以鑒別。需氧生長，在普通培養(yǎng)基上可以生存并能產(chǎn)生水溶性的色素。在血平板上會溶血。
該菌含有O抗原（菌體抗原）以及H抗原（鞭毛抗原）。O抗原包含兩種成分：一種是其外膜蛋白，為保護性抗原；另一種是脂多糖，有特異性。O抗原可用以分型。
細(xì)菌的實驗室檢查及其它檢查
1. 標(biāo)本采集 采自不同感染部位的各種標(biāo)本，包括血液、尿液、痰標(biāo)本、膿汁、穿
刺液等。還包括來自醫(yī)院環(huán)境中的各種標(biāo)本如水、空氣、物體表面采樣等。
2. 染色鏡檢 為革蘭陰性菌，菌體細(xì)長且長短不一，有時呈球桿狀或線狀，成對或短鏈狀排列。菌體的一端有一根鞭毛。
3. 分離培養(yǎng) 對有正常菌群存在的臨床標(biāo)本或采自環(huán)境中的標(biāo)本應(yīng)接種選擇性培養(yǎng)基如MAC；對無正常菌群存在的臨床標(biāo)本如血液、腦脊液、穿刺液等可接種普通或血瓊脂培養(yǎng)基。在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長18~24h可以見到扁平、濕潤的菌落，該菌所產(chǎn)生的帶熒光的水溶性青膿素與綠膿素相結(jié)合將使得培養(yǎng)基呈亮綠色；在血瓊脂平板上生長時可以見到在菌落的周圍有溶血環(huán)，菌落呈金屬光澤；如果是在液體培養(yǎng)基中則呈渾濁狀生長，在液體表面形成菌落，而在培養(yǎng)基底部細(xì)菌的生長不良。
4. 生長實驗 該菌在4℃不生長而在42℃可以生長。
5. 生化鑒定 該菌能氧化分解葡萄糖但不分解甘露醇、麥芽糖和蔗糖。不產(chǎn)生吲哚、常不液化明膠、可分解尿素，還原硝酸鹽為亞硝酸鹽并產(chǎn)生氧氣。
6. 分型
（1） 噬菌體分型 所應(yīng)用的噬菌體現(xiàn)有24株，分型率達90%。
（2） 血清學(xué)分型 利用O抗原進行分型，目前可分20個血清型。
（3） 質(zhì)粒指紋圖分析：此項技術(shù)是對同種細(xì)菌的不同株進行同源性分析的一種方法。根據(jù)細(xì)菌攜帶質(zhì)粒的情況進行分析。
三、細(xì)菌的防治
及時隔離治療患者，同時提高醫(yī)院內(nèi)的消毒水平以及癥療操作的規(guī)范和安全，能夠切實降低的院內(nèi)感染水平。
在治療方面，若感染位于外表而且局限,可用1%醋酸沖洗或局部應(yīng)用多粘菌素B或多粘菌素E,即可奏效。壞死組織必須擴清,而膿腫則必須引流。
若需腸外給藥治療,用妥布霉素或慶大霉素5mg/（kg.d）分劑給予,可治愈大多數(shù)性尿路感染。根據(jù)臨床反應(yīng),可將劑量減少到3mg/（kg.d）以盡量減少副作用。腎功能不全者的劑量必須減少。對酶介導(dǎo)耐妥布霉素和慶大霉素的應(yīng)該用丁胺卡那霉素.很多專家主張治療嚴(yán)重感染可用氨基糖苷類再加一種抗假單胞菌的β-內(nèi)酰胺.幾種青霉素,包括替卡西林,哌拉西林,美洛西林和阿洛西林對也有效。其他有良效的藥還有頭孢他定,頭孢平,氨曲南,亞胺培南,美羅匹寧和環(huán)丙沙星。替卡西林zui為常用,其劑量為16~20g/d,靜脈注射。哌拉西林,阿洛西林,頭孢平,頭孢他定,美羅匹寧和亞胺培南體外試驗對某些耐替卡西林菌株有效。
對全身性感染或粒細(xì)胞缺乏的病人,應(yīng)該用一種對有效的氨基糖苷與一種抗假單胞菌青霉素合用。對嗜中性白細(xì)胞減少并且腎功能處于邊緣狀態(tài)的病人,可用非氨基糖苷類聯(lián)合療法,例如雙重β-內(nèi)酰胺或β-內(nèi)酰胺加一種氟喹諾酮,也是安全的。尿路感染?？捎敏溶崞S青霉素或環(huán)丙沙星或其他氟喹諾酮類藥物治療。但氟喹諾酮類不應(yīng)該用于兒童,因為該藥對軟骨有不良作用。兩種抗假單胞菌藥物合用時,在治療過程中出現(xiàn)耐藥菌株的機會明顯減少。
四、細(xì)菌的生物安全防護
根據(jù)《病原微生物生物實驗室生物安全管理條例》中的有關(guān)規(guī)定，人間傳播的微生物名錄（待頒布）屬于三類，BSL-2。相關(guān)的防護事宜包括：
（1）操作要求
1、實驗時，未經(jīng)實驗室主任同意，限制或禁止進入實驗室。
2、不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外櫥柜或冰箱中。
3、所有的操作過程應(yīng)盡量細(xì)心，避免產(chǎn)生和濺出氣溶膠。
4、對于污染的銳器，必須時刻保持高度的警惕，包括針、注射器、玻片、加樣器等。
5、注射和吸取感染材料時，只能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體的）。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進行人工處理，要不將之小心放入不會被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中，轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒，高壓殺菌。
6、打碎的器皿不能直接用手處理，必須用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷
子。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前，應(yīng)按照相關(guān)的規(guī)定進行消毒。
7、所有的培養(yǎng)物、儲存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前，均應(yīng)使用可行的消毒方法進行消毒，如高壓滅菌。轉(zhuǎn)移到就近實驗室消毒的物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi)，密封運出實驗室。離開該系統(tǒng)進行消毒的物料，在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝，其包裝應(yīng)符合有關(guān)的法規(guī)。
8、濺出或偶然事件中，明顯暴露于傳染源時，要立即向?qū)嶒炇抑魅螆蟾?。進行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評估、觀察、治療，保留書面記錄。
9、按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或灑出后、或受到其他傳染源污染后，實驗室設(shè)備和工作臺面應(yīng)當(dāng)使用有效的消毒劑消毒。污染的設(shè)備在送去修理、維護前，要按照相關(guān)的規(guī)定消毒；在離開設(shè)施轉(zhuǎn)移前，要按照相關(guān)的規(guī)定打包運輸。
（2）安全設(shè)備
1、正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、是*、或其他合適的人員防護設(shè)施、或物理遏制裝置。
2、確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實驗過程，包括離心、研磨、勻漿、劇烈
震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標(biāo)本等。
3、涉及高濃度或大體積的傳染源時，若選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機，若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開，則可在開放實驗室內(nèi)離心。
4、當(dāng)必須在生物安全柜外處理標(biāo)本時，需采取面部保護措施（跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置），以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。
5、在實驗室內(nèi)，必須使用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非實驗室
區(qū)域時，防護服必須留在實驗室內(nèi)。防護服可以在實驗室內(nèi)處理，也可以在洗衣房中洗滌，但不能帶回家中。
6、可能接觸潛在傳染源、被污染的表面或設(shè)備時，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重復(fù)使用，不能用于接觸“潔凈”的表面（鍵盤、等），也不應(yīng)當(dāng)戴著到實驗室外。要備有帶滑石粉的乳膠手套。脫掉手套后，要洗手。
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